lch
发布于 2026-04-08 / 0 阅读
0

NanoTemper全新变温控制|让您对蛋白稳定性深层表征更有信心


在生物药研发中,单次热扫描往往不能告诉我们全部真相。以曲妥珠单抗(赫赛汀,Herceptin)为例:两种缓冲液体系的常规热变性曲线差异细微,T m 值相近,传统实验几乎无法区分哪种缓冲液更"安全"。但在实际开发中,选错缓冲液可能意味着巨大的下游风险——不可逆聚集、质量批次失败,乃至项目延误。这正是 Prometheus Panta温度控制(Temperature Control) 新功能登场的意义所在。



什么是 Temperature Control?


Temperature Control 是 PR. Panta Control 软件中全新推出的测量模式,提供两种实验形式:

  • Temperature Cycling(温度循环) :让温度按自定义曲线反复升降,模拟真实热应力场景

  • Temperature Stepping(温度步进) :以受控步进方式逐级升温,精细解析各个温度节点的蛋白行为

两种模式均可同步采集nanoDSF、背反射(Backreflection)、DLS和SLS数据——一次实验,多维深层洞察。



为什么这很重要?——揭示不可逆展开


回到 Herceptin 的案例:

图片

图1: 赫赛汀(Herceptin)在醋酸钠缓冲液(pH 5,绿色)与 PBS(pH 7.4,紫色)中的常规热变性多参数曲线。从上至下依次为:nanoDSF ratio 曲线、ratio 一阶导数、浊度(Turbidity)及 DLS 粒径(Cumulant Radius) 随温度升高的变化曲线。

从一阶导数峰位可见,pH7.4 条件下 T m 1值略高;浊度曲线显示两种缓冲液在第一结构域展开后均出现大量无定形聚集体;DLS 数据则显示 pH5 的聚集起始温度(T size )略高。然而,整体曲线差异细微——仅凭这组数据,难以自信地做出 最优制剂 的选择,这正是Temperature Control模式发挥作用的起点。

在常规模式下,两条曲线几乎"不分伯仲"。而切换至 Temperature Cycling 模式后,画面截然不同:

图片

图2:Temperature Cycling模式下赫赛汀的nanoDSF ratio原始数据。

灰色虚线为温度循环曲线(incremental ramp profile),绿色与紫色分别代表两种缓冲液体系。每条数据轨迹的上端数据点构成" 热曲线 "(hot curve,反映展开过程),下端数据点构成" 冷曲线 "(cold curve,反映不可逆展开程度),二者共同揭示蛋白稳定性行为的 深层信息


进一步提取冷/热曲线的一阶导数后,结论一目了然:

图片

图3: 赫赛汀在两种缓冲液中热展开可逆性的一阶导数分析。虚线为 hot curve(展开曲线),实线为 cold curve(不可逆展开曲线),颜色对应各自缓冲液体系。

pH 7.4(紫色):cold curve 的第一峰与 hot curve 同步出现,表明第一个结构域展开时即发生不可逆展开,在任何温度下均存在聚集风险。pH 5(绿色):cold curve 的峰值推迟至第二结构域展开后才出现,稳定性窗口更宽,聚集风险显著降低。结论 :应选择醋酸钠缓冲液(pH 5),规避赫赛汀 CH2 结构域的不可逆展开风险



Temperature Control 覆盖研发全流程


研发阶段

核心价值

可开发性评估

早期筛除在轻度热应力下易不可逆聚集的候选分子

下游工艺开发

明确下游工艺安全操作温度范围,支持灌装-完成工序的设计空间定义

制剂开发

基于热可逆性曲线对制剂条件进行排序,定义温度暴露限值



AI 就绪数据,解锁更多可能


Panta数据可导出为 Excel、CSV 和 JSON 格式。配合 LLM 工具,科学家可灵活自定义数据分析流程——高密度的 nanoDSF 数据与 AI 工具结合,让稳定性表征从"实验"迈向"决策"。

作为业内 唯一 将Temperature Cycling和Stepping与多参数同步检测相结合的平台,Prometheus Panta 帮助生物制剂开发团队:

  • 更早识别高风险候选分子与制剂

  • 更深理解蛋白稳定性机制

  • 更快做出自信的开发决策

图片

现有Panta用户注意‼️

Temperature Control 功能已随 PR.Panta Control v1.11 版本上线,通过软件升级即可解锁,无需购置新仪器。限时优惠活动进行中,欢迎联系我们的技术团队了解详情。


图片


Prometheus Panta 蛋白稳定性分析平台

「 全面表征蛋白质构象、胶体和化学稳定性 」


四大技术模块 :微量差示扫描荧光nanoDSF 、背反射Backreflection、动态光散射 DLS、静态光散射 SLS,可灵活升级,可同时开启
无需标记样品 :利用蛋白质内源荧光检测,无需添加染料,可进行无标记Thermal Shift Assay
操作简便 :仅需 10μL 样品,通过毛细作用上样,一 “吸” 一 “放” 即检测
可升级自动化机械臂,实现全自动无人值守
兼容去垢剂,可检测高粘度样品
无液流系统,免维护